實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)是一項以PCR反應(yīng)為基礎(chǔ)的DNA定量技術(shù),通過對目標(biāo)基因在擴增過程中產(chǎn)生的拷貝數(shù)進行實時的定量,從而達到對目的基因的定性和定量分析。常用的對PCR產(chǎn)物進行熒光定量檢測的方法有兩種:一種是利用熒光染料與雙鏈DNA結(jié)合,通過熒光強度進行定量;另一種是利用攜帶了熒光報告基團的特異DNA探針對目標(biāo)基因進行定量。
技術(shù)優(yōu)勢
1.實驗過程透明,結(jié)果真實可靠。
2.豐富的qPCR實驗操作經(jīng)驗,確保您在極短的時間里得到真實可靠的實驗結(jié)果。
3.強大的技術(shù)支持團隊,為您的科研道路保駕護航。
服務(wù)流程
1.樣品RNA的抽提。
2.RNA質(zhì)量檢測。
3.樣品cDNA合成。
4.梯度稀釋的標(biāo)準品及待測樣品的管家基因(β-actin)實時定量PCR。
5.制備用于繪制梯度稀釋標(biāo)準曲線的DNA模板。
6.待測樣品的待測基因?qū)崟r定量PCR。
7.實時定量PCR使用引物列表。
8.電泳。
9.數(shù)據(jù)分析及報告交付。
樣品要求
1.細胞樣品:收集細胞后放入液氮中速凍保存或速東24h后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存;收集細胞后,視細胞量,直接加入1~1.5mL Trizol溶解裂解細胞,再轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。
2.組織樣品:動物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存,液氮凍存24h后可轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存;組織樣品同樣可以采用Trizol溶解裂解后放入-80℃冰箱保存。特殊組織(植物等)建議采用新鮮組織即刻提取RNA,逆轉(zhuǎn)合成cDNA后-20℃保存?zhèn)溆谩K袠悠返奶幚砗捅4孢^程中,切總反復(fù)凍融。
注:樣品運輸條件:樣品運輸條件根據(jù)實驗樣品的處理條件,可以選擇液氮或者干冰運輸。
發(fā)貨內(nèi)容
1.熒光定量所有原始結(jié)果(包括RNA濃度及純度檢測數(shù)據(jù),qPCR原始數(shù)據(jù),擴增曲線及熔解曲線圖)。
2.詳細的實驗報告(包括實驗原理,實驗方法,儀器,試劑,引物或探針序列,數(shù)據(jù)分析結(jié)果等)。