產(chǎn)品參數(shù):
檢測(cè)儀器 | 酶標(biāo)儀 | 檢測(cè)波長(zhǎng) | 340 nm |
主要檢測(cè)設(shè)備及配套 | 酶標(biāo)儀/96孔UV板 | 信號(hào)響應(yīng) | 遞增型 |
預(yù)計(jì)測(cè)定時(shí)間 | 3h (100 Samples) | 需自備試劑 | 無 |
檢測(cè)方法 | NADH速率法 | 運(yùn)輸條件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
檢測(cè)原理:
α-酮戊二酸脫氫酶催化α-酮戊二酸、NAD+和CoA生成琥珀酰CoA、CO2和NADH,NADH在340 nm具有特征吸收峰,通過吸光值變化即可測(cè)定NADH的生成速率,進(jìn)而表征α-KGDH的活性。
產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)注意事項(xiàng):
①測(cè)定過程中所有試劑和待測(cè)樣本均需在冰上放置,以免變性和失活;
②比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,可以取燒杯裝入一定量37℃或25℃的蒸餾水,將燒杯放入37℃或25℃恒溫水浴中,在反應(yīng)過程中將比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中;
③準(zhǔn)確在0 s和120 s處完成讀數(shù),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;
④?A測(cè)定應(yīng)在0.01-0.25之間,若?A測(cè)定大于0.25,需將樣本進(jìn)行稀釋后再進(jìn)行測(cè)定;
⑤提取液中含有一定濃度的蛋白(約1 mg/mL),測(cè)定樣品蛋白濃度時(shí)需減去提取液的蛋白含量;